Amplificación Isotérmica de Ácidos Nucleicos
El futuro del diagnóstico molecular
DOI:
https://doi.org/10.29105/bys9.17-235Palabras clave:
Diagnóstico molecular, qPCR, ADN, ARN, NASBA, LAMP, RPAResumen
El diagnóstico molecular es una herramienta clave con aplicaciones en salud humana, veterinaria y seguridad alimentaria, entre otras áreas. En salud humana, la pandemia de COVID-19 impulsó el uso masivo de pruebas de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (también conocidas como qPCR cuando es de carácter cuantitativo), que permitieron tamizajes a gran escala y millones de diagnósticos a nivel global, consolidando a la qPCR como la técnica molecular más utilizada en la historia. Sin embargo, el acceso a estas pruebas no fue equitativo en todos los países, ya que la qPCR requiere infraestructura especializada y equipos de un costo elevado. Frente a esta limitación, la amplificación isotérmica de ácidos nucleicos ha surgido como una alternativa revolucionaria en diagnóstico molecular, permitiendo la detección rápida y precisa de patógenos y biomarcadores sin necesidad de equipo sofisticado. En este artículo, se abordan tres métodos que están marcando el futuro de la detección molecular: NASBA (Amplificación Basada en Secuencias de Ácidos Nucleicos), LAMP (Amplificación Isotérmica Mediada por Bucle) y RPA (Amplificación por Recombinasa y Polimerasa). Cada técnica ofrece ventajas en sensibilidad, especificidad y facilidad de uso, haciéndolas especialmente adecuadas para entornos de bajos recursos y diagnósticos en el punto de atención. Estas tecnologías no solo pueden revolucionar el diagnóstico, sino también permitir una respuesta rápida y efectiva ante nuevas crisis sanitarias.
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Becherer, L., Borst, N., Bakheit, M., Frischmann, S., Zengerle, R., Von Stetten, F., 2020. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) – review and classification of methods for sequence-specific detection. Analytical Methods 12, 717–746. https://doi.org/10.1039/C9AY02246E
Clipper, B., 2020. The Influence of the COVID-19 Pandemic on Technology: Adoption in Health Care. Nurse Lead 18, 500. https://doi.org/10.1016/J.MNL.2020.06.008
Compton, J., 1991. Nucleic acid sequence-based amplification. Nature 350, 91–92. https://doi.org/10.1038/350091A0
Curtis, K.A., Morrison, D., Rudolph, D.L., Shankar, A., Bloomfield, L.S.P., Switzer, W.M., Owen, S.M., 2018. A multiplexed RT-LAMP assay for detection of group M HIV-1 in plasma or whole blood. J Virol Methods 255, 91–97. https://doi.org/10.1016/J.JVIROMET.2018.02.012
González-González, E., Lara-Mayorga, I.M., Rodríguez-Sánchez, I.P., Zhang, Y.S., Martínez-Chapa, S.O., Santiago, G.T., Alvarez, M.M., 2021. Colorimetric loop-mediated isothermal amplification (LAMP) for cost-effective and quantitative detection of SARS-CoV-2: the change in color in LAMP-based assays quantitatively correlates with viral copy number. Analytical Methods 13, 169–178. https://doi.org/10.1039/D0AY01658F
Kia, V., Tafti, A., Paryan, M., Mohammadi-Yeganeh, S., 2023. Evaluation of real-time NASBA assay for the detection of SARS-CoV-2 compared with real-time PCR. Ir J Med Sci 192, 723–729. https://doi.org/10.1007/S11845-022-03046-2
Kurosaki, Y., Magassouba, N., Oloniniyi, O.K., Cherif, M.S., Sakabe, S., Takada, A., Hirayama, K., Yasuda, J., 2016. Development and Evaluation of Reverse Transcription-Loop-Mediated Isothermal Amplification (RT-LAMP) Assay Coupled with a Portable Device for Rapid Diagnosis of Ebola Virus Disease in Guinea. PLoS Negl Trop Dis 10, e0004472. https://doi.org/10.1371/JOURNAL.PNTD.0004472
Li, R., Wang, Jinfeng, Sun, X., Liu, L., Wang, Jianchang, Yuan, W., 2021. Direct and Rapid Detection of Mycoplasma bovis in Bovine Milk Samples by Recombinase Polymerase Amplification Assays. Front Cell Infect Microbiol 11. https://doi.org/10.3389/FCIMB.2021.639083
Mao, Z., Lei, H., Chen, R., Ren, S., Liu, B., Gao, Z., 2024. CRISPR/Cas13a analysis based on NASBA amplification for norovirus detection. Talanta 280. https://doi.org/10.1016/J.TALANTA.2024.126725
Mullis, K., Faloona, F., Scharf, S., Saiki, R., Horn, G., Erlich, H., 1986. Specific enzymatic amplification of DNA in vitro: the polymerase chain reaction. Cold Spring Harb Symp Quant Biol 51 Pt 1, 263–273. https://doi.org/10.1101/SQB.1986.051.01.032
Notomi, T., Okayama, H., Masubuchi, H., Yonekawa, T., Watanabe, K., Amino, N., Hase, T., 2000. Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Res 28. https://doi.org/10.1093/NAR/28.12.E63
Piepenburg, O., Williams, C.H., Stemple, D.L., Armes, N.A., 2006. DNA Detection Using Recombination Proteins. PLoS Biol 4, e204. https://doi.org/10.1371/JOURNAL.PBIO.0040204
Smits, H.L., Van Gemen, B., Schukkink, R., Van Der Velden, jacobus, Tjong-a-hung, S.P., Jebbink, maarten F., Ter Schegget, J., 1995. Application of the NASBA nucleic acid amplification method for the detection of human papillomavirus type 16 E6-E7 transcripts. J Virol Methods 54, 75–81. https://doi.org/10.1016/0166-0934(95)00032-P
Tan, M., Liao, C., Liang, L., Yi, X., Zhou, Z., Wei, G., 2022. Recent advances in recombinase polymerase amplification: Principle, advantages, disadvantages and applications. Front Cell Infect Microbiol 12, 1019071. https://doi.org/10.3389/FCIMB.2022.1019071/BIBTEX
Total COVID-19 tests, URL https://ourworldindata.org/grapher/full-list-total-tests-for-covid-19?tab=table&facet=none&country=ECU~IND~IDN~ITA~SEN~NZL~MEX#explore-the-data (accessed 10.24.24).
Wand, N.I.V., Bonney, L.C., Watson, R.J., Graham, V., Hewson, R., 2018. Point-of-care diagnostic assay for the detection of Zika virus using the recombinase polymerase amplification method. J Gen Virol 99, 1012. https://doi.org/10.1099/JGV.0.001083
Zingg, J.-M., Yang, Y.-P., Seely, S., Joshi, P., Roshid, M.H.O., Iribarren Latasa, F., O’Connor, G., Alfaro, J., Riquelme, E., Bernales, S., Dikici, E., Deo, S., Daunert, S., 2023. Rapid isothermal point-of-care test for screening of SARS-CoV-2 (COVID-19). Aspects of Molecular Medicine 1, 100002. https://doi.org/10.1016/J.AMOLM.2023.100002
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